解密新冠病毒实验室检测

有这样一群坚持奋战在“看不见的”战场上的医技人员，他们每天直接或间接接触大量有潜在感染风险的患者血液、体液、分泌物。以过硬的专业给临床提供最有利的诊断依据；不计报酬，无论生死，以最高昂的斗志投入疫情狙击战，他们是检验科的医生。自新型冠状病毒感染肺炎疫情发生以后，上海市同济医院检验科在医院防控整体部署下，迅速启动最高级别响应机制。根据国家或地方的各种法律、法规、行业规范或专家共识，制定了标本采集、运送、检测、废弃流程，加强了样本送检及检测流程中的生物安全防护，更严格地执行了标本废弃后高压或化学消毒处置。为提升患者对新型冠状病毒核酸检测认识，同济医院检验科专业人员撰写新冠病毒实验室检验相关知识，共同解密解密新冠病毒实验室检测。

新冠病毒检测技术分类

传统病毒类感染检验策略是针对性检测病毒本身，或人体免疫系统为了抵抗病毒产生的相应抗体。直接分离病原体是传染性疾病检测的金标准，但直接分离新型冠病毒，对检测实验室、检验人员有非常严格的要求，只有在符合生物安全三级(Biological Safety Level 3,BSL-3)实验室才能开展。目前大多医院检验科有生物安全二级实验室，在采用可靠的方法灭活前可进行的病毒抗原检测、血清学检测、核酸检测、生化分析等操作。

新型冠状病毒核酸检测

目前广泛采用核酸检测，是通过实时荧光 RT-PCR，检测新型冠状病毒3段高度保守基因序列，即开放读码框1ab（Open reading frame 1ab，ORF1ab）、 核 壳 蛋 白 （Nucleocapsid protein，N）基因以及包膜蛋白(Envelop，E)基因。（“高度保守”指发生突变的几率低，如果病毒再次发生变异，该段序列也不会发生改变）。根据国家卫生健康委新型冠状病毒感染的肺炎实验室检测技术指南（第五版），在实验室要确认一个病例为阳性，需要满足以下条件：同一份标本中新型冠状病毒2个靶标（ORF1ab、N）特异性实时荧光RT-PCR检测结果均为阳性；如果出现单个靶标阳性的检测结果，则需要重新采样，重新检测。

新型冠状病毒抗体检测

检测抗体，既检测机体对新冠病毒产生的抗体。人体B细胞识别病毒抗原后分化为浆细胞，分泌抗体，与相应抗病毒原特异性结合。抗体分为五种，即IgG、IgA、IgM、IgE、IgD。lgM抗体在患者感染的第7天或发病的第3天就能产生,随后浓度下降或消失；IgG抗体产生时间晚于IgM，但存在时间长，可能终身存在。在感染性疾病的实验室检检查中，经常对IgG和IgM分开检测，判断疾病是过往感染，还是即时感染。IgM抗体阳性表示近期感染，IgG抗体阳性表示感染时间较长或既往感染。检验方法包括酶联免疫吸附法，免疫荧光法，和胶体金法。近期多个科技公司和钟南山院士团队研发的15分钟内检测新冠病毒的胶体金快速诊断试剂盒就是基于此原理。

疑似病例标本采集由接受培训的专业医护人员完成，采集标本种类包括：

01、上呼吸道标本：包括咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物等。

02、下呼吸道标本：包括深咳痰液、呼吸道抽取物、支气管 灌洗液、肺泡灌洗液、肺组织活检标本；

03、重症病例优先采集下呼吸道标本；

04、出现眼部感染症状的病例，需采集眼结膜拭子标本；

05、出现腹泻症状的病例，需留取粪便标本。

06、同时可采集血液标本进行抗体检测

为满足快速检测新冠病毒的需求，检验科参与了新冠病毒抗体IgM/IgG胶体金检测性能验证项目，可为快速鉴别新冠肺炎与普通流感提供重要依据。检验科分子组更是以100%符合率通过上海市临检中心组织《新型冠状病毒（2019-nCoV）核酸检测能力》验证，本次能力验证是实验室检测技术的综合反应，体现检验科专业硬实力，为实验室提升检测水平，未来开展新冠病毒检测提供强有力的支撑。

（图片源于网络）

供稿：上海市医学会检验医学专科分会

作者：吉　萍　上海市同济医院

审核：李　冬　上海市医学会检验医学专科分会副主任委员