培养基灭菌的方法，其特征在于包括下列步骤。首先，将培养基加入到一个或多个反应器中，然后将所述培养基加入到另一个或多个反应器中。接着，将所述培养养基在所述反应器中进行培养，直到所述培养基达到所需的ph值为止。最后，将所述培养基转移到一个或多个容器中，并且将所述容器密封到所述培养养基上。

一：培养基灭菌的方法

1.灼烧灭菌
将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属用具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌。此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰灼烧来灭菌。
2.干热灭菌
将灭菌物品放入干热灭菌箱内，在160～170℃加热1～2h可达到灭菌的目的。能耐高温的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿(吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌。
3.高压蒸汽灭菌
将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内。把锅内的水加热煮沸，将其中原有的冷空气彻底排除后，将锅密闭，继续加热使锅内的气压逐步上升，温度也随之升到100℃以上。为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa，温度为121℃的条件下，维持15~30
min。

二：培养基灭菌温度和时间

斜面培养基的灭菌温度121.3度，时间20-30分钟。

三：培养基灭菌金属器械灭菌一般分别采用什么灭菌效果最好

一、食用菌菌种瓶的选择

用100毫升医用盐水瓶代替试管作盛装培养基的容器。

二、培养基的配制

1．配方：马铃薯200克，葡萄糖20克，琼脂18～20克，水1000毫升。

2．制作：马铃薯挖去芽眼，去皮洗净，切成薄片后加水，在铝锅中煮沸25～30分钟，用4层纱布过滤，取滤液放入铝锅中，加入琼脂，小火加热并不断搅拌，待琼脂溶化后加入葡萄糖，加开水补足1000毫升，搅匀，趁热装入盐水瓶中，每瓶装8～10毫升，塞上棉塞 棉塞要求干燥、松紧、长度合适 ，再用牛皮纸包住棉塞及瓶口部分，用胶圈扎紧瓶口。

三、灭菌

采用高压灭菌，若没有专用高压锅，可用家用高压锅进行灭菌。方法是：将装好培养基的菌种瓶放置在高压锅中，瓶间留有空隙，不可堆放过紧，以利蒸汽循环，灭菌彻底。当压力表指针指到0．05时，打开放气阀，集中排出冷空气，使压力降到零时，关闭排气阀进行升压灭菌，自动放气后保持30分钟 家用普通高压锅灭菌1．5小时 ，让其自然冷却，取出放置在接种箱中备用。

四、菌种分离

主要采用组织分离法。通常是从食用菌子实体内部分离纯菌种，操作时，从子实体内切取一小块组织，放在培养基中培养可长出纯菌种，且菌丝萌发快，遗传性状稳定，后代不易发生变异。

1．种菇消毒：种菇采下后，切去菌柄，放入洗净的盘内，在装有紫外灯的接种箱内照射20～30分钟。

2．接种块切取：在已消毒的接种箱内，撕开子实体，用经酒精灯火焰杀菌冷却的小刀，在菌柄与菌盖交接处内部切取黄豆大小组织块，放入菌种瓶内培养基上培养。

3．接种块选择部位：接种块选择部位因食用菌种类不同而异，菇体肥厚的种菇，在菌盖外缘菌盖皮和菌褶交接处切取组织块进行分离。

菌体小、盖薄、柄空的菌类 如金针菇 ，应快速击掉菌盖，用接种针钩取菌柄顶端生长点组织进行分离。

菌肉极薄菌柄中空孢子不易萌发的伞菌类，可采用子实层分离法，选取半破膜的子实体，移入培养基上，菌丝萌发后即转入新的培养基上。对子实体较大、质地结实的多孔菌类，应取子实体外缘菌肉组织块。

含水量低的子实体切取5平方厘米的小块，在酒精灯火焰上烘烤5～10秒钟，使子实体表现微焦，然后用无菌刀切取菌肉组织一小块，移入培养基上。

五、培养及管理

将放入组织块的菌种瓶竖放在室内架上或平台上，室内温度控制在20～28℃，经过1～2天组织块萌发。菌丝生长期间注意观察。发现污染及时挑出，经过10天左右菌丝长满瓶，母种制作成功。

四：培养基灭菌后可以放多久

放冰箱保存时间有限，夏季顶多过夜。灭菌存放和不灭菌差别很大，灭菌后室温都可以保存很久。

能保存一周。不灭菌的更短，一天左右